Реагенты для реал-тайм ПЦР InvestigatorQuantiplex

Качественная и количественная оценка ДНК человека и мужской ДНК с наивысшей чувствительностью

  • Раздельная оценка деградации мужсокй ДНК и общей ДНК человека
  • Наивысшая чувствительность для мужской ДНК в смеси с женской ДНК
  • Простая и ясная оценка качества ингибиции, которая коррелирует с STR профилями
  • Стабильные результаты из любого типа образца и концентрация в лучшем в своём роде динамическом диапазоне
  • Результаты ПЦР в течение одного часа

Investigator Quantiplex Pro RGQ – это готовый набор реагентов для количественной ПЦР в реальном времени. Предназначен для детекции и количественной оценки общей ДНК и мужской ДНК. Новая технология ПЦР с быстрыми циклами обеспечивает высокую чувствительность для детекции ДНК человека, а также детекции мужской ДНК на фоне присутствия женской ДНК. Чувствительность до 0,1 пг/мкл и высокоточная количественная оценка в линейном диапазоне до 0,5 пг/мкл. Новая разработка в оценке количества ДНК дает информацию о статусе деградации как мужской ДНК, так и общей ДНК человека в образце, а также информацию о наличии ингибирторов. Новый внутренийй контроль более чувствителен к ингибиторам и соответствует устойчивости STR.

Кат. ном. 387316

Investigator Quantiplex Pro RGQ Kit (200)

Для 50 образцов: 50 Колонок QIAamp MinElute, Протеиназа K, Носитель RNA, Буферы, Пробирки для сбора жидкости (2 мл) Для использования на приборах для ПЦР в реальном времени QIAGEN Rotor-Gene Q. Содержит: Quantiplex Pro RGQ Reaction Mix (реакционная смесь), Quantiplex Pro RGQ Primer Mix (смесь праймеров), Male Control DNA M1 (контрольная мужская ДНК), QuantiTect Nucleic Acid Dilution Buffer (буфер для разведения нуклеиновых кислот). Набор реагентов Investigator Quantiplex Pro RGQ Kit предназначен для молекулярно-биологических исследований в криминалистических целях, идентификации личности и установления отцовства. Продукт не предназначен для использования в диагностике, профилактике, или лечения заболеваний.

Производительность

Набор обеспечивает быстрый и точый результат количественного анализа в широком динамическом диапазоне от 200 нг/мкл до 0,5 нг/мкл, с чувствительностью до 0,1 пг/мкл. Также, набор обладает высочайшей чувствительностью к мужской ДНК в присутствии очень высокого количества женской ДНК (до 400000:1).

Эффективная оценка качества набора построена на основе нового Контроля Деградации ДНК (Degradation Control – DC) и Внутреннего Контроля (Internal Control – IC). Новый Контроль Деградации ДНК обеспечивает наилучшее раздельное определение деградации и мужской, и общей ДНК человека. Внутренний Контроль также определяет потенциальных ингибиторов ПЦР. IC более чувствителен к ингибиторам и соответствует устойчивости STR. Результат количественной оценки остается надежным. Более того, IC этого набора отражает Сенсор Качества в профиле Investigator 24plex STR, но также может быть изменен в соответствии с индивидуальными требованиями.

Принцип

Investigator Quantiplex Pro RGQ Kit – это готовый к использованию набор реагентов для детекции общей и мужской ДНК, а также оценки деградации и общей ДНК, и мужской ДНК, используя количественную ПЦР в реальном времени. Набор обеспечивает быструю и точную оценку ДНК человека как в референсных образцах, так и в образцах, изъятых с мест преступлений. Содержит реагенты и ДНК-полимеразу для специфичной амплификации мультикопийного маркера 4NS1C, (фрагмент из 91 пары оснований, повторяется на нескольких хромосомах человка), и для детекции специфических ПЦР продуктов на приборе Rotor-Gene Q. Таргетный регион для оценки общей ДНК подобран таким образом, чтобы обеспечить высокую чувствительность. Для него используется желтый канал RGQ. Мужская ДНК регистрируется в зеленом канале RGQ и обеспечивает высокую чувствительность детекции в смешанных образцах (женская/мужская ДНК). Таргетный регион мужской ДНК определяется как фрагмент длиной 81 п.о., для детекции используется зеленый канал RGQ. Кроме того, Investigator Quantiplex Pro RGQ Kit содержит сбалансированный внутренний контроль амплификации, который нужен для подтверждения успешной реакции и определяет наличие ингибиторов ПЦР. Внутренний контроль детектируется фиолетовым каналом RGQ как фрагмент длиной 434 п.о. Набор также, детектирует более длинные продукты ПЦР (аутосомный участок 353 п.о., участок Y-хромосомы 359 п.о.) из того же локуса (4NS1CR), в котором находятся малый аутосомный участок (91 п.о.) и гоносомный мужской участок (81 п.о.) Более длинные фрагменты больше подвержены деградации, что позволяет использовать эту особенность для точной оценки уровня деградации как мужской, так и общей ДНК в образце. Фрагмент длиной 353 п.о. (общаяя ДНК) детектируется в красном канале, фрагмент 359 п.о. (мужская ДНК) – в оранжевом канале амплификатора Rotor-Gene Q. Детекция амплификации происходит благодаря зондам TaqMan, которые используются вместе с реагентами для быстрой ПЦР. Зонды, меченные с двух сторон, содержат флуорофор и гаситель флуоресценции на 5' и 3' конце, соответственно. Во время этапа элонгации, ДНК-полимераза QuantiNova удаляет флурофор и гаситель благодаря своей 5' и 3' экзонуклеазной активности. Благодаря такой технологии, прибор детектирует флуоресценцию, которая пропорциональна количеству образовавшегося ПЦР продукта.

Детектируемые целевые фрагменты

Целевой участок Длина ампликона Канал Плоидность Количество копий
Целевой участок, малый аутосомный 91 п.о. Жёлтый Диплоидный Мультикопийный
Целевой участок, большой аутосомный 353 п.о. Красный Диплоидный Мультикопийный
Целевой участок мужской ДНК, малый гоносомный 81 п.о. Зеленый Гаплоидный Мультикопийный
Целевой участок мужской ДНК, большой гоносомный 359 п.о. Оранжевый Гаплоидный Мультикопийный
Внутренний контроль ПЦР 434 п.о. Фиолетовый Синтетический фрагмент

Применение

Набор реагентов Investigator Quantiplex Pro RGQ используется для количественной оценки общей ДНК человека, а также мужской ДНК. Определяет, присутствуют ли в реакции ПЦР ингибиторы, и нужна ли дальнейшая очистка образца.

Используется для:

  • Исследования референсных образцов для баз данных, а также для исследования образцов, изъятых с мест преступлений
  • Определения отцовства
  • Исследования образцов при расследовании преступлений против половой неприкосновенности личности
  • Идентфикации жерт катастроф и в антропологических исследованиях
  • Прочих исследованиях для идентификации человека
Характеристики Спецификации
Вносимый объём 2 мкл образца ДНК
Амплификатор Rotor-Gene Q, 5 plex или 6 plex